凝胶迁移或电泳迁移率实验

一、实验介绍

凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变性的聚丙烯凝胶电泳上，分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同，可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白，可用纯化蛋白，部分纯化蛋白，或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时，依据目的RNA结合蛋白的位置，可用纯化或部分纯化的蛋白，也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特异），和其它非相关的片段（非特异），来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下，依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

二、EMSA实验步骤：
1、探针的标记：
2、探针的纯化：
3、EMSA 胶的配制：
4、EMSA结合反应：
5、电泳分析：

三、客户需知：
方法：同位素P32标记探针/生物素/荧光素标记/进行检测。
技术要点：实验过程包括核蛋白的提取，同位素标记/生物素/荧光素标记/与纯化，凝胶电泳，胶片暴光等。在EMSA操作中会用到同位素，要注意实验室环境和实验员的保护。

四、客户提供：
细胞　25ml的细胞瓶培养的细胞。
组织　200mg-400mg
探针　自备探针。

五、交付内容

实验步骤、结果报告、图片

六、服务周期
10-20天

七、收费标准 

以上报价仅供参考，具体项目周期和报价以实际情况为准

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